沖洗: 材料自固定液中取出后,需立即沖洗,使其中所有的固定液全部除去,以妨礙染色 有些固定液,如10%福爾馬林液、Bouin氏液固定的材料,若時間較短的話可不必沖洗。但時間過長亦需沖洗 3、脫水(37度恒溫箱) 所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于有機溶劑的滲入,這一過程稱為脫水。 脫水是否徹底,直接關(guān)系到組織是否能充分透明 脫水過度(原因是組織在純酒精內(nèi)時間過久,發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化)容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫(溫度超過36℃)、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟
中二甲苯過多等等。一般我們總認為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān),而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系,其實低濃度的酒精具有強大的穿透力,比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水,組織如果在低濃度酒精里充分脫水,在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份,因此,僅需短時間就可完成,如果這時不縮短純酒精的時間,便會引起組織發(fā)脆;如果脫水時加溫,使用丙酮,還可引起組織收縮,并影響免疫組織化學的標記.
![](http://zs1.img-/pic/94046/zuzhiqiepi/20150504162711_7875_zs_sy.jpg)
bao埋 (1)先將熔化的石蠟傾入bao埋生產(chǎn)模型中,再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的社團塊,使社團塊的{zd0}面或被特別指定處的社團面向下埋入熔蠟中;應將社團塊平正地置放于bao埋生產(chǎn)模型底面的中央處;bao埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細小社團應彼此靠近并位于同一最簡單的面上;腔壁、皮膚和黏膜社團必須垂直bao埋(立埋)。 (2)將與社團塊相關(guān)的病理號小條置入bao埋生產(chǎn)模型內(nèi)熔蠟的一側(cè)。 (3)待bao埋生產(chǎn)模型內(nèi)的熔蠟表面凝固后,即將生產(chǎn)模型移入冷水中加速凝固。
(4)從bao埋生產(chǎn)模型中掏出凝固的bao埋蠟塊(簡稱蠟快),用刀片去除社團塊周圍的過多石蠟(社團塊周圍保留1~2mm石蠟為宜)。將bao埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。 (5)將病理號小條安穩(wěn)地烙貼在蠟塊一側(cè)(編號應清晰可見)。 (6)把修整好的蠟塊烙貼在撐持器上,以備切片。 (7)使用bao埋機的要領(lǐng)按有關(guān)廠商的說明書操作。
![](http://zs1.img-/pic/94046/zuzhiqiepi/20150504162711_7875_zs_sy.jpg)
固定液有多種,由一種化學物質(zhì)組成者,稱為單純固定液;由多種化學物質(zhì)組成者稱為混合固定液。甲醛是最常用的一種單純固定液,它對組織的主要作用是使組織硬化和防腐,對組織的穿透力強,固定均勻,組織收縮較少,能保持組織細胞的固有形態(tài),染色后顏色清晰。但甲醛放置日久后,可自行分解,產(chǎn)生甲酸,使溶液呈酸性,影響細胞核著色。因此,在備用的甲醛溶液中加入某些小劑量的中和劑,使溶液呈中性(或弱堿性),稱其為中性甲醛。中性甲醛屬于混合固定液。用中性甲醛固定組織,更有利于保持組織的抗原性,有利于免疫組織化學標記物的檢測,并可避免甲醛色素的形成,但不能保存組織內(nèi)尿酸鹽類結(jié)晶。乙醇也是一種單純固定劑,有固定兼脫水的作用,但其滲透力較弱,固定速度較慢,易使組織變脆,另外,乙醇能使核蛋白質(zhì)沉淀,核蛋白質(zhì)被沉淀后能溶于水,不利于染色體的固定,是核著色不良,影響形態(tài)學的觀察,故乙醇一般不作常規(guī)固定液應用。
![](http://zs1.img-/pic/94046/zuzhiqiepi/20150504162711_7875_zs_sy.jpg)