小鼠胚胎細胞步驟如下：
1）棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
2）向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。
3）加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
4）傳代比例：1:2-1:3


小鼠胚胎細胞常見問題及解決方案
1）培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2）細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。
傳代方法：收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精xd后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。


小鼠胚胎細胞技術(shù)相關(guān)問答：
1. 如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基？
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，{sx}MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。
2. 何時須更換培養(yǎng)基？
視細胞生長密度而定， 或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。 
3. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

上海篤瑪生物相關(guān)促銷產(chǎn)品信息

小鼠胚胎細胞	DMEM+10% Calf serum	貼壁	成纖維細胞
大鼠肺泡巨噬細胞	F-12K+20% FBS	貼壁和懸浮混合	巨噬細胞
正常大鼠腎細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
大鼠腎小管導管上皮細胞	DMEM+5% FBS	貼壁	上皮細胞樣
負鼠腎小管細胞	MEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
小鼠骨髓基質(zhì)細胞	MEMα-+20% FBS	貼壁	成纖維細胞樣
人腎癌細胞	RPMI-1640+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
人卵巢癌細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
小鼠畸胎瘤細胞	MEMα-+7.5% BCS+2.5% FBS	貼壁	上皮細胞樣
小鼠淋巴樣瘤細胞	RPMI-1640+10% horse serum	懸浮	淋巴母細胞
小鼠骨髓瘤細胞	DMEM+10% FBS	懸浮	淋巴母細胞
小鼠肥大細胞瘤細胞	DMEM+10% FBS	半懸浮	肥大細胞
小鼠成纖維細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	成纖維細胞
人胰腺癌細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
人前列腺癌細胞	F-12 +10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
豬髖動脈內(nèi)皮細胞	RPMI-1640+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
豬腎細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
人肝癌細胞	RPMI-1640+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
人Burkitt's淋巴瘤細胞	RPMI-1640+10% FBS	懸浮	淋巴母細胞
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞	DMEM + 10% FBS	貼壁	不規(guī)則圓形
人肝膽管癌細胞	RPMI-1640 + 10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
大鼠嗜堿性細胞白血病細胞	MEM+15% FBS(滅活)	貼壁	成纖維細胞
人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	紡錘形,多核
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞	RPMI-1640 + 10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
大鼠肝癌細胞	DMEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
人結(jié)腸腺癌細胞	MEM+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣
人子宮內(nèi)膜癌細胞	DMEM:F12+0.005mg/mL INS+10% FBS	貼壁	上皮細胞樣